dna检测的方法及取样方法（dna检测方法）

1.检测手段：PCR

现行的STR检测方法主要使用聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）扩增含有特定STR位点序列的dna片段，并通过电泳的方式检测其长度的方法，来确定STR的重复次数。PCR的原理见《环境监测假阳性，为什么难以杜绝？》一文第二部分。

目前主流使用的试剂盒可在同一试管内扩增15个等位基因和1个性别鉴定基因。使用引物（Primer）扩增之后产生的DNA产物片段大小随着SRT重复单位及重复数量的乘积增大而增大（最终的扩增片段除了含有STR序列之外，还包括STR两侧的序列，总片段长度在90~370个碱基对范围内）。扩增之后的产物使用毛细管电泳的方法进行扩增片段的分离检测。

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图：某主流试剂盒检测结果示例。每一个STR位点可以看到1到2个峰值，根据大小可以判断其等位基因重复次数。如果是2个峰值，代表此STR位点存在两个不同的等位基因，且应该在其子女或父母中检测到其中一个。如果是一个峰值，代表此STR位点的两个等位基因一致，其父母的STR位点都应含有这个等位基因，其子女必有此等位基因。

2. 检测样本：DNA很稳定

从唾液到骨骼，再到牙齿以及头发，身体的任何有核细胞中都可以找到核 DNA。取少量 DNA 即可使用PCR技术进行扩增，该技术可对STR的少数靶标进行大量复制，以达到能够检测的DNA扩增片段量。因此，只要能够获得待测对象的DNA，不管什么材料，均可用于检测。通常，亲子鉴定取样的方法类似新冠病毒核酸检测的取样方法，只不过亲子鉴定取样只需要在口腔内壁刮取足量的自体细胞即可。

DNA很稳定。对于一些待测对象已经去世的情况，只要不烧成灰，其毛发、骨骼、特别是牙齿牙髓部分，基本都可以获得可用于亲子鉴定的DNA样品。对于毛发来说，含有毛囊的样品要远优于不含毛囊的样本，但是不含毛囊的毛发目前报道也可以用于亲子鉴定（可以选用线粒体DNA或者适用于毛发的dna提取及扩增技术）[4]。如果无法获取死者遗体样本，也可在死者衣物或私人用品上（比如梳子）获取可用于检测的样品。面对这种情况，可能需要排除样品是否已经被其他人的DNA所污染。

图：细胞内所含染色体DNA（右上）及可用于鉴定的样本，左上开始逆时针依次为毛发、唾液、血液、精液、尿液，后四种样品可以取用其干燥的斑块。[5]

现代生物技术的发展可对未出生的胎儿进行无创DNA检测。这种检测是通过静脉穿刺采集母体血液，从而获得“无细胞胎儿 DNA ” (Cell-free fetal DNA，cffDNA ) 来进行的。所谓cffDNA 是在母体血液中自由循环的胎儿 DNA，来源于胚胎滋养层细胞。cffDNA 分析是一种无创产前诊断方法（遗传病、染色体畸形筛查等），常用于高龄孕妇。妊娠九周后出现的cffDNA也可用于亲子鉴定（法律是否允许，需要咨询相关法律人士）